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如何更好的對優(yōu)等胎牛血清進行儲存與解凍？
發(fā)布日期：
2019-01-11
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優(yōu)等胎牛血清生產(chǎn)過程在一個可控的條件下進行。SIP滅菌、無菌過濾和分裝作為關(guān)鍵的滅菌過程證實是有效的。產(chǎn)品生產(chǎn)符合質(zhì)量管理標(biāo)ISO9001。胎牛血清生產(chǎn)過程遵循IVDD78/79/EC。血清熱滅活通過56度水浴保持30分鐘完成。熱滅活是破壞補體的方法之一，確保細胞不會通過抗體連接而溶解。適用于MRC5、HEPG-2、Hela、3T3、Sf9、CHO、HYBRIDOMA、原代細胞和神經(jīng)原細胞等的生長。
優(yōu)等胎牛血清解凍：將血清從冰凍區(qū)中取出后（切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀），先置于2～8℃區(qū)域中使之融化，然后在室溫下使之全融。使用前再預(yù)溫到將使用的溫度（如37℃），但必須注意的是，解凍過程中應(yīng)輕輕地搖晃均勻。
如何儲存和解凍優(yōu)等胎牛血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復(fù)凍融。
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
優(yōu)等胎牛血清是從適合人類衛(wèi)生習(xí)慣的農(nóng)場收集的。有時，也可能用其他的牛血清，如新生牛血清或者供體牛血清。在細胞培養(yǎng)中，血清供應(yīng)了豐富的高分子蛋白，低分子量營養(yǎng)物，疏水載體蛋白和其他體外細胞生長必要的成分如激素和粘附因子。同時，血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分，起到保護細胞的作用。在細胞培養(yǎng)過程中是否選擇添加血清，主要根據(jù)基礎(chǔ)培養(yǎng)基化學(xué)成分，培養(yǎng)細胞的類型和培養(yǎng)體系而定。
熱滅活的目的是為了去除血清中的補體等對熱敏感的物質(zhì)，但是在優(yōu)等胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。
研究人員曾對商業(yè)胎牛血清中的補體成分進行測定，他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1、C6僅達成年動物血清的1-3%，而其它補體成分僅有成年動物的5-50%，至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補體固定實驗，我們也在多個不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結(jié)果。
因此，優(yōu)等胎牛血清在大部分的細胞培養(yǎng)中是不需要滅活的，但在免疫學(xué)研究中，培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。
